1、取Protein A柱平衡至室温，用 10倍柱体积的PBS洗涤平衡层析柱；

2、含抗体的血清或其它体液高速离心后，将上清与等体积2×PBS缓冲液混合，调整pH以及离子浓度后，缓慢加入层析柱；

3、用10倍柱体积以上的PBS洗涤，至流出液无蛋白检出；

4、加入2-5倍柱体积0.1 M柠檬酸（pH 2.7）或者0.1 M甘氨酸（pH 3.0），收集洗脱液；

5、洗脱后的抗体加入饱和Na2HPO4溶液进行中和；

6、浓缩洗脱液到所需体积，加入50%甘油-20℃保存；

7、层析柱中Protein A柱使用后需要及时处理，酸洗脱抗体以后，使用10倍柱体积PBS洗柱平衡到中性，20%乙醇溶液充分洗涤后，封闭上下两端，保存在4℃。

葡萄球菌蛋白A（Staphylococcal Protein A）是从金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）细胞壁中提取的一种细胞壁蛋白，可与哺乳动物IgG抗体的Fc段特异性结合。通过重组蛋白A与溴化氰活化琼脂糖珠偶联，制成预装蛋白A柱层析介质，可广泛结合不同物种和亚型的免疫球蛋白Fc片段。 ​

技术特性与应用

一、应用场景

1、抗体纯化：适用于从不同物种和亚型（如人、鼠、兔等）中纯化IgG类抗体。

2、免疫复合物捕获：可用于共免疫沉淀（Co-Immunoprecipitation）实验中免疫复合物的富集。

二、核心优势

1、多位点交联技术：通过多靶点共价修饰提升稳定性与结合力。

2、高特异性与广谱结合：对IgG Fc段的结合能力覆盖绝大多数免疫球蛋白类型。

3、高结合容量：1毫升基质可特异性结合 ​5-10毫克抗体。

试剂与材料清单（Reagents and Materials Provided）

常规保存：4℃保存；

如需长期保存，需添加甘油后置于-20℃，有效期为一年。​